原位觀察顯微鏡可在樣品原始環(huán)境下進行實時、動態(tài)觀察,其構(gòu)造和組成部分通常如下:
光學(xué)系統(tǒng)
??照明系統(tǒng)??:為觀察提供光源,有透射式和反射式之分。透射式照明光線從樣品下方穿過,適用于透明或半透明樣品;反射式照明光線從樣品上方照射,用于不透明樣品。光源類型多樣,如鹵素?zé)?、LED燈、汞燈等,不同光源具有不同光譜特性,可按需選擇。
??物鏡和目鏡??:物鏡是顯微鏡最重要的光學(xué)部件之一,直接決定顯微鏡的放大倍數(shù)和分辨率,有不同放大倍數(shù)可供選擇,如 5X、10X、20X 等。目鏡則進一步放大物鏡所成的像,常見放大倍數(shù)為 10X,也有 15X、20X 等。
??聚光鏡??:其作用是將光源發(fā)出的光線聚焦到樣品上,增強樣品的照明亮度,提高觀察的清晰度。聚光鏡有不同的數(shù)值孔徑,可根據(jù)觀察需要進行更換。
機械系統(tǒng)
??載物臺??:用于放置樣品,有固定式和移動式兩種。移動式載物臺可以通過手動或電動方式在 X、Y 方向移動,方便觀察樣品的不同區(qū)域。
??調(diào)焦裝置??:包括粗調(diào)焦旋鈕和細調(diào)焦旋鈕,用于調(diào)節(jié)物鏡與樣品之間的距離,使樣品成像清晰。粗調(diào)焦旋鈕用于快速調(diào)整焦距,細調(diào)焦旋鈕用于精確調(diào)整焦距。
??物鏡轉(zhuǎn)換器??:可以在多個物鏡之間進行切換,方便改變顯微鏡的放大倍數(shù)。物鏡轉(zhuǎn)換器通常有 4 - 6 個物鏡安裝位置。
成像系統(tǒng)
??圖像傳感器??:將光學(xué)圖像轉(zhuǎn)換為電信號,常見的圖像傳感器有 CCD(電荷耦合器件)和 CMOS(互補金屬氧化物半導(dǎo)體)。CCD 具有高靈敏度、低噪聲等優(yōu)點,適用于對圖像質(zhì)量要求較高的場合;CMOS 則具有成本低、功耗小等優(yōu)勢。
??圖像采集卡??:負責(zé)將圖像傳感器輸出的電信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號,并傳輸?shù)接嬎銠C中進行處理和存儲。
??顯示器??:用于顯示觀察到的圖像,可根據(jù)需要選擇不同尺寸和分辨率的顯示器。
原位環(huán)境控制系統(tǒng)
??溫控系統(tǒng)??:可精確控制樣品周圍的溫度,模擬不同的環(huán)境溫度條件,溫度控制范圍通常為 - 196℃至 600℃,甚至更寬。
??氣氛控制系統(tǒng)??:能夠調(diào)節(jié)樣品周圍的氣體成分和壓力,如提供氧氣、氮氣、氫氣等不同的氣體環(huán)境,以及控制氣壓范圍,以滿足不同實驗需求。
??液體環(huán)境系統(tǒng)??:對于需要在液體環(huán)境中進行觀察的樣品,該系統(tǒng)可以提供穩(wěn)定的液體環(huán)境和液體流動控制,以模擬生物體內(nèi)的液體環(huán)境或化學(xué)反應(yīng)中的液相環(huán)境。
電氣系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)
??電氣系統(tǒng)??:為顯微鏡的各個部件提供穩(wěn)定的電源供應(yīng),確保顯微鏡的正常運行。同時,還具備過流、過壓保護等功能,以保護顯微鏡的安全。
??軟件系統(tǒng)??:用于控制顯微鏡的操作,如調(diào)節(jié)照明強度、焦距、物鏡轉(zhuǎn)換等,還能對采集到的圖像進行處理、分析和存儲,如圖像增強、測量、拼接等。